Определение резус-фактора презентация к уроку на тему

image

Резус-фактор – один из параметров крови, который отражает присутствие или отсутствие на мембранах красных клеток особого белка Rh. В случае, если он есть, кровь резус-положительная и обозначается Rh+, при его отсутствии резус-отрицательной – Rh-.

Этот белок есть на эритроцитах большинства живущих на планете, но примерно у 15 % его нет. Его отсутствие или присутствие никак не сказывается на здоровье. Rh передается от родителей и на протяжении всей жизни остается неизменным.

Еще советуем:imageРезус-фактор и резус-конфликт

Определение резус-фактора происходит во время анализа крови на группу. Эта информация необходима при переливании, при подготовке к хирургическому вмешательству и в период вынашивания плода.

Во время беременности может произойти конфликт между кровью будущей матери и кровью ребенка. Зная о том, что женщина резус-отрицательная, врачи могут заранее предпринять меры, чтобы избежать конфликта и сохранить здоровье резус-положительного плода.

Сдать кровь на резус можно в лаборатории любой поликлиники или в стационаре. Для исследования делают забор из пальца или из вены.

Методов определения Rh несколько:

  • На чашках Петри методом конглютинации.
  • С помощью цоликлонов.
  • Экспресс-методом в пробирках без подогрева.
  • Желатиновым методом.

Суть анализа заключается в выявлении антигена D с помощью антирезусных сывороток или моноклональных реагентов (цоликлонов) в реакции агглютинации (склеивания эритроцитов и образования хлопьев) в пробирках или на плоскости.

Комплекс препаратов для определения Rh-принадлежности

Для определения резус-фактора понадобятся чашки Петри, индивидуальные пипетки, раствор натрия хлорида изотонический, сыворотки стандартные для всех групп крови. Порядок проведения:

  1. Капают рядом по две капли реагента двух серий для трех исследований (в три ряда).
  2. В каждую из серий добавляют по капле исследуемой крови и эритроцитов (контрольных положительных и контрольных отрицательных).
  3. Перемешивают, на десять минут ставят чашку на водяную баню (47°C).
  4. Результат определяют по наличию или отсутствию хлопьев (слипшихся эритроцитов). Если красные клетки склеились, Rh положительный, если слипания не произошло, Rh отрицательный.

Чтобы узнать резус-фактор, применяют моноклональные реагенты – цоликлоны, которые получают методом генной инженерии из асцитной жидкости мышей. Rh определяется во время реакции агглютинации, которая происходит на плоскости.

Процедура должна проводиться в помещении с хорошим освещением. Для теста берут цельную кровь, эритроциты, находящиеся в сыворотке, плазме, физрастворе или консерванте, или отмытые эритроциты. Для получения лучшего результата нужны эритроциты высокой концентрации, а пластинка, на которой будет происходить реакция, подогревается до 37°C.

Алгоритм действий:

  1. На планшет индивидуальной пипеткой капают большую каплю реагента (примерное количество – 0,1 мл).
  2. Около реагента капают исследуемую кровь (маленькую каплю) или эритроциты в количестве 0,01 мл.
  3. С помощью стеклянной палочки как следует смешивают реагент и кровь и каждые 30 секунд тарелку покачивают в течение трех минут, наблюдая за реакцией визуально.
  4. Реакция агглютинации начинается через 15 секунд, явно выраженной становится через 1 минуту, но результат учитывают только спустя три минуты.

Если началась реакция агглютинации (склеивание эритроцитов и выпадение их в осадок), кровь маркируют резус-положительной, если слипания красных клеток не наблюдается, резус-фактор отрицательный. Склеенные эритроциты, которые представляют собой хлопья, видны невооруженным глазом.

Результат трактуется в зависимости от того, произошла ли агглютинация красных клеток

В качестве реагента применяется сыворотка под названием «антирезус», которая является универсальной для всех групп крови.

  1. В пробирку помещают каплю крови (эритроцитов) в количестве 0,05 мл, затем добавляют 2 капли реагента «антирезус».
  2. Пробирку поворачивают, не встряхивая, чтобы содержимое перемешалось и равномерно растеклось по стеклу.
  3. Примерно через три-пять минут происходит склеивание эритроцитов.
  4. Чтобы исключить агрегацию красных клеток, в пробирку добавляют раствор изотонический NaCl в количестве 2-3 мл и несколько раз переворачивают пробирку, чтобы содержимое перемешалось.
  5. После этого считывают результат. Если появились хлопья на фоне более светлой жидкости, Rh положительный, если хлопьев нет, жидкость окрашена равномерно в розовый цвет, Rh – отрицательный.

Нужно сказать, что универсальные сыворотки могут дать ложноположительную реакцию с Rh-отрицательными эритроцитами. Может произойти неспецифичное склеивание красных клеток, на поверхности которых есть другие антитела – не атирезус. Поэтому параллельно проводят тестирование с контрольным раствором усилителя. Если после введения контрольного раствора происходит агглютинация, результат считается недостоверным, и тестирование повторяют с другим реагентом.

Пробирочный метод определения Rh

Эта методика основана на применении желатина (в виде раствора 10 %). Для тестирования используются и стандартные антирезусные реагенты, и цоликлоны.

  1. В пробирку капают одну каплю крови (0,05 мл) или эритроцитов в виде взвеси в сыворотке (50 %).
  2. Затем 2 капли подогретого заранее до жидкого состояния раствора желатина.
  3. Далее 2 капли реагента, затем смешивают.
  4. Пробирку ставят на пять-десять минут на водяную баню (47°C) или на полчаса в сухой термостат с такой же температурой.
  5. Затем в пробирку добавляют физиологический раствор (5-8 мл), закрывают крышкой и осторожно поворачивают два-три раза, чтобы перемешать.
  6. Для определения наличия хлопьев содержимое пробирки осматривают невооруженным глазом на свет или через увеличительное стекло.

При использовании желатина не происходит неспецифической агглютинации. После проведения такой пробы необходимы контрольные тесты:

  • со стандартными Rh+ эритроцитами;
  • со стандартными Rh- эритроцитами;
  • с исследуемой кровью (эритроцитами) и желатином.

Информация о резус-факторе необходима в случае переливания крови. Для гемотрансфузии может быть использована только совместимая по группе и по резусу кровь. Кроме этого, следует определить резус-фактор во время беременности. Еще лучше узнать его на этапе ее планирования. Это необходимо, чтобы предотвратить резус-конфликт между Rh-положительным плодом и Rh-отрицательной женщиной.

Видео по теме:

Похожие статьи Определение группы крови и резус-фактора с помощью цоликлонов Что такое резус-фактор крови? Чем опасен разный-резус фактор при беременности —>

Экспресс-метод определения стандартным универсальным реагентом в пробирке без подогрева

Для исследования можно использовать свежую несвернувшуюся кровь, взятую из пальца (или вены) непосредственно перед исследованием, или консервированную кровь без предварительной обработки, а также эритроциты из пробирки после формирования сгустка и отстаивания сыворотки.

Методика проведения реакции. Исследование проводят в центрифужных пробирках объёмом не менее 10 мл. На дно пробирки вносят одну каплю стандартного универсального реагента, представляющего собой антирезусную сыворотку группы АВ(IV), разведённую 33% раствором декстрана . Затем в неё добавляют одну каплю исследуемой крови (или эритроцитов). Круговым вращением пробирки содержимое размазывают по её внутренней поверхности таким образом, чтобы содержимое растеклось по стенкам. Это значительно ускоряет агглютинацию и делает её крупнолепестковой. Агглютинация на стенках пробирки наступает, как правило, в течение первой минуты, но для образования устойчивого комплекса антиген-антитело и чёткой агглютинации наблюдать следует не менее 3 мин. Затем для исключения неспецифической агрегации эритроцитов в пробирку добавляют 2-3 мл физиологического раствора и перемешивают путём одно-двукратного перевертывания пробирки (без взбалтывания!).

Трактовка результатов. Наличие агглютинации (крупные хлопья на фоне просветлённой жидкости) указывает на резус-положительную принадлежность исследуемой крови. Отсутствие агглютинации (в пробирке гомогенно окрашенная розовая жидкость) свидетельствует о резус-отрицательной принадлежности исследуемой крови.

Лабораторные способы определения резус-фактора

Для определения резус-принадлежности крови больного в условиях лаборатории применяют четыре основных метода.

Метод агглютинации в солевой среде

Используют специальные сыворотки, содержащие полные антитела анти-резус. Эритроциты в виде 2% взвеси в изотоническом ра- створе хлорида натрия соединяют в пробирках с антирезусной сывороткой. Пробирки помещают на 1 ч в термостат при температуре 37 ?С, после чего осадок эритроцитов на дне пробирки рассматривают с помощью лупы и по его форме учитывают результат. При положительном результате (Rh+) осадок имеет характерный рисунок в виде нитей или зернистости. При отрицательном (Rh-) осадок размещается равномерным слоем и имеет вид правильно очерченного круга.

Метод агглютинации в присутствии желатина

B две пробирки помещают по 0,02-0,03 мл осадка исследуемых эритроцитов. Затем в первую пробирку добавляют 2 капли (0,1 мл) 10% раствора желатина и 2 капли (0,1 мл) анти-резусной сыворотки, во вторую (контрольную) пробирку — 2 капли (0,1 мл) 10% раствора желатина и 2 капли (0,1 мл) физиологического раствора.

Содержимое осторожно перемешивают. Затем пробирки инкубируют в термостате при температуре 45-48 ?С в течение 30 мин, после чего добавляют 5-8 мл физиологического раствора и переворачивают пробирки 1-2 раза для перемешивания.

Результат учитывают, просматривая пробирки на свет невоору- жённым глазом или через лупу. Eсли эритроциты резус-положи- тельны, произойдёт их агглютинация. Отсутствие агглютинации свидетельствует о том, что испытуемая кровь резус-отрицательная. B контрольной пробирке агглютинация эритроцитов должна отсутствовать.

Непрямой антиглобулиновыи тест (реакция Кумбса)

Эта реакция наиболее чувствительна для выявления неполных антител к ауто- и изоантигенам эритроцитов. К ней, как правило, прибегают при возникновении трудностей в определении резус-при- надлежности крови, связанных с нечёткими результатами, полученными при других методах исследования. Реакция основана на использовании антиглобулиновой сыворотки.

При обработке резус-положительных эритроцитов неполными антителами анти-Rh наступает их обволакивание, сенсибилизация по отношению к антиглобулиновой сыворотке, которая агглютинирует сенсибилизированные эритроциты, поскольку имеет антитела к глобулинам.

В пробирку вносят антирезусную сыворотку и отмытые физиологическим раствором эритроциты, помещают на 1 ч в термостат при температуре 37 ?С, после чего эритроциты тщательно отмывают. Последующий этап реакции проводят на плоскости. Каплю взвеси эритроцитов смешивают с равным количеством антиглобулиновой сыворотки и учитывают результат. Наличие агглютинации — показатель того, что исследуемый образец крови резус-положительный. Если агглютинация отсутствует, то испытуемая кровь резус-отрицательная.

Реакция с анти-D-моноклональными антителами

На планшете смешивают большую каплю (0,1 мл) анти-D-моноклональных антител и маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови.

48. Проба на совместимость по резус — фактору.

Оснащение: кровь донора, сыворотка реципиента, 33% раствор полиглюкина, центрифужная пробирка, физиологический раствор натрия хлорида, пипетки.

Последовательность действий:

а) Из вены реципиента взять 3-5 мл крови, центрифугировать.

б) На дно центрифужной пробирки разными пипетками нанести 2 капли сыворотки больного, 1 каплю донорской крови и 1 каплю 33% раствора полиглюкина.

в) Содержимое перемешать, наклонив пробирку почти до горизонтального положения и медленно вращать вокруг оси, распределив содержимое по стенкам ровным слоем.

г) Процедуру продолжать в течение 5 минут.

д) Через 5 минут добавить 3-4 мл физиологического раствора хлорида натрия.

е) Содержимое перемешивать, 2-3 раза наклоняя пробирку до горизонтальной плоскости (не взбалтывать!).

Трактовка результатов:

Отсутствие агглютинации, равномерное окрашивание содержимого пробирки свидетельствуют о резус-совместимости крови донора и реципиента; наличие агглютинации — о несовместимости крови донора и реципиента по резус-фактору

После проведения первой пробы необходимо провести пробу на совместимость по Rh-фактору. Для этого существует 2 доступных метода — реакция в сывороточной среде и в желатине.

Первый метод: на чашку Петри наносят 1—2 капли сыворотки больного и маленькую каплю донорской крови, после чего ее на 10 минут ставят в водяную баню (+46~+48 °С). Наличие агглютинации свидетельствует о несовместимости.

Второй метод: на дно пробирки помещают маленькую каплю донорской крови, добавляют 2 капли подогретого 10 % раствора желатина и 2 капли сыворотки крови больного. Через 10 минут инкубирования в водяной бане при. температуре +46—+48 °С в пробирку добавляют 5 мл подогретого изотонического раствора хлорида натрия. ‘Наличие агглютинации свидетельствует о несовместимости крови донора и реципиента.

 Стоимость услуги по определению резус-принадлежности обычно составляет несколько сотен рублей. Узнать стоимость… Резус-принадлежность, как и группу крови, следует знать каждому: в экстремальных ситуациях это знание может спасти жизнь. Узнать больше об определении основных групп крови… Сдать биоматериал в рамках оказания диагностических медуслуг можно не выходя из дома — удобно и быстро. Подробнее… Пройти функциональное и визуальное обследования можно в удобном для вас медицинском центре. Найти медицинский центр… Контроль качества лабораторных исследований, осуществляемый по международным стандартам, повышает вероятность получения достоверных результатов. Как подготовиться? Спецпредложения, скидки и акции частных лабораторий помогут сэкономить на медицинских услугах. Посмотреть текущие акции… К выбору лаборатории для сдачи биоматериала следует подойти ответственно. Желательно, чтобы медицинский центр был хорошо оснащен. Что стоит учесть при выборе лаборатории?

Наверное, каждый знает, что кровь человека имеет определенные характеристики. Первое, что приходит на ум, — это группа: I, II, III, IV. Вторая важная характеристика — резус-фактор. Но если о значении группы крови большинство имеет хотя бы базовое представление, то значение слова «резус» для многих остается непонятным.

Что же это за понятие и почему оно важно для каждого человека?

Что такое резус-фактор и почему о своем «статусе» нужно знать?

На самом деле, все довольно просто.

Наша кровь состоит из клеток, эритроцитов, на поверхности которых может быть специфический белок (антиген) — тот самый резус — либо его может не быть. В первом случае говорят о том, что кровь резус-положительная, во втором — резус-отрицательная. По статистике, 80–85% населения Земли имеют этот специфический белок. Люди, у которых антиген отсутствует, имеют одну важную особенность: при переливании (трансфузии) им «положительной» крови или при беременности, в случае вынашивания плода с противоположным резусом, организм может начать «атаку» на инородный белок. Это чревато серьезными осложнениями, вплоть до гибели пациента (при переливании) или ребенка (при вынашивании).

Поэтому резус-фактор нельзя не учитывать при планировании материнства или в экстремальных жизненных ситуациях, когда человеку необходимо стать донором или реципиентом крови.

Как узнать свой резус-фактор: положительный vs отрицательный

Поскольку резус — свойство крови, для того, чтобы определить его наличие или отсутствие, проводят анализ именно этого биоматериала.

Самый известный метод исследования — определение резус-фактора цоликлонами. В лабораторных условиях небольшое количество крови смешивают со специальной сывороткой. Если при этом начинается склеивание эритроцитов (агглютинация), резус считают положительным, в противоположном случае — отрицательным.

Есть и более совершенные методы, например гель-фильтрация. Кровь помещают в пробирку со специальным гелем с реагентами. При отрицательном резусе она проходит до самого дна, при положительном — начинается процесс склеивания и биоматериал остается в верхней части колбы. Данный метод более чувствительный и наглядный и в настоящее время применяется почти в 60% мировых клиник.

Ошибки при определении резус-фактора в современных условиях чрезвычайно редки, но все же встречаются. Они могут иметь технический характер, в частности, к ним приводит использование старых образцов крови, непрофессионализм персонала поликлиники (путаница с пробирками, неверная оценка результатов). Встречаются и ошибки по биологическим причинам: при некоторых заболеваниях печени, почек в крови могут присутствовать посторонние белки или бактерии, способные исказить результат.

Когда проводят определение резус-фактора крови

Несмотря на то, что наличие специфического белка на поверхности эритроцитов является очень важным показателем, многие люди живут, не зная свой статус. Проверить резус-фактор можно и без направления врача, однако в ряде случаев анализ обязателен:

  • при подготовке к материнству и беременности;
  • при гемолитической болезни новорожденных;
  • при подготовке к хирургической операции, поскольку потенциально может понадобиться переливание крови или трансплантация;
  • если человек выступает донором или реципиентом крови, костного мозга или органов.

Подготовка к исследованию и забор биоматериала

Процедура взятия образца биоматериала ничем не отличается от обычного (например, общего) анализа крови: медсестра собирает в пробирку немного венозной крови (в некоторых клиниках — капиллярной), запечатывает и маркирует пузырек. Процедура практически безболезненна для пациента и отнимает всего несколько минут.

Если анализ будет проходить в частной лаборатории или клинике, то с правилами подготовки к нему обычно можно ознакомиться на сайте соответствующего медцентра. Обычно соблюдения строгого режима перед исследованием не требуется, однако желательно, чтобы с последнего приема пищи прошло не менее четырех часов. В случае приема лекарств лучше уточнить у медиков, не повлияют ли они на результат теста: некоторые лекарственные средства, например, препараты метилдопа, способны искажать показатели.

Это интересно В народе людей с отрицательным резусом крови считают и потомками пришельцев, и обладателями сверхспособностей. Конечно, ученые не соглашаются с подобным мнением и говорят об отрицательном резус-факторе как об одной из генетических особенностей человека наравне с цветом волос. Интересно, что резус напрямую зависит от расовой принадлежности: у европеоидов отрицательный резус встречается в 15% случаев, у негроидов — в 7%, а у азиатов — лишь в 1%.

Как расшифровать результаты

Анализ на резус-фактор — один из самых быстрых в исполнении. По результатам исследования пациент получает бланк, в котором стоит отметка Rh+ либо Rh-. Первый вариант означает наличие специфического белка, то есть положительный резус, второй — отрицательный.

Внимательного отношения требует лишь отрицательный резус. Во-первых, следует сообщать о нем в случае хирургических вмешательств, переливаний крови. Врачи обычно назначают контрольный анализ резуса непосредственно перед операцией или трансфузией, и если его результаты не совпали с данными предыдущих исследований, то это повод провести тест повторно.

Во-вторых, особенное значение отрицательный резус-фактор имеет для женщин, планирующих материнство. Если отец ребенка резус-положителен, плод может также иметь специфический белок в крови. В этом случае возможен резус-конфликт: организм матери может начать «атаку» на ребенка, что вызывает ряд тяжелых последствий, вплоть до гибели малыша.

Какие еще анализы могут потребоваться при определении резус-принадлежности и почему?

Отсутствие в крови специфического белка резуса в настоящий момент не является препятствием для вынашивания здорового ребенка. При первой беременности вероятность конфликта невелика даже при разных резусах матери и малыша. Однако по правилам, чтобы обезопасить плод, при отрицательном резусе будущей маме (если отец ребенка при этом резус-положителен) придется сдать ряд дополнительных анализов.

В первую очередь, это анализ на резус-антитела. Исследование необходимо для того, чтобы выявить, произошел ли резус-конфликт, начал ли организм матери «атаковать» плод. Анализ сдается несколько раз в течение беременности: при постановке на учет, а начиная с 18-20-ой недель — ежемесячно. Если организм начал вырабатывать антитела, женщине вводят специальные препараты, предотвращающие резус-конфликт. В сложных случаях может понадобиться госпитализация будущей мамы.

Существуют способы, позволяющие узнать резус-фактор плода на ранних стадиях беременности. Подобные исследования проводят, например, по крови матери, с использованием методов молекулярно-генетических исследований. Если белок отсутствует, то нет необходимости в профилактике — конфликта в этом случае не произойдет. Однако даже в этом случае специалисты не рекомендуют женщинам отказываться от дополнительного наблюдения и анализов на антитела: при определении резуса плода вероятность ошибки выше, чем у стандартных исследований.

Где можно сдать кровь на резус-фактор и группу крови?

Узнать о наличии или отсутствии в крови специфического белка довольно просто: в настоящий момент такое исследование проводят практически в любом медицинском центре. Это и государственные больницы, и частные клиники и лаборатории, а также пункты сдачи крови. На последних мы не будем останавливаться подробно, так как все-таки это не специализированные учреждения для сдачи анализов и не каждый может похвастаться отсутствием противопоказаний для донорства.

В городских и муниципальных больницах исследование на резус-фактор проводят бесплатно (при наличии полиса ОМС), однако только по направлению терапевта. Недостатком также можно считать очереди и необходимость забирать результаты лично. Многие жалуются на длительные сроки ожидания результатов, использование устаревших методов исследования и низкую квалификацию персонала в отдельных клиниках.

Частные медцентры и лаборатории проводят анализ гораздо быстрее (как правило, от нескольких часов до 1–2 суток), а результаты можно узнать онлайн, по телефону или получить по электронной почте. Обычно в таких центрах не приходится тратить время на ожидание своей очереди и получать направление. Оборудование в частных клиниках часто совершеннее и современнее, чем в государственных. Из недостатков — услуга платная: цена анализа крови на резус-фактор обычно составляет несколько сотен рублей.

Резус-фактор, как и группу крови, должен знать каждый: в экстремальных ситуациях это знание может спасти жизнь человеку или его близким. В обязательном порядке свой резус необходимо узнать женщинам, планирующим рождение малыша. Чтобы быть уверенным в достоверности анализа, лучше выбирать надежные клиники и лаборатории, работающие в соответствии с требованиями мировых стандартов.

Практически каждый человек хотя бы единожды за свою жизнь проходил тест для установления принадлежности группы крови. О методах проведения данного анализа и об их достоверности пойдет речь далее.

Для чего проводится диагностика?

Группа крови – это определенный ряд антигенов, размещенных на поверхности эритроцитов, которые и определяют их специфичность. Таких антигенов известно очень много, поэтому принято единую классификацию крови по АВО и резус-фактору.

Этот показатель в обязательном порядке определяется у пациентов перед хирургической операцией, военным, полицейским и другим категориям людей, которые могут потребовать срочного переливания крови.

Стандартная методика определения группы крови

Самый распространенный метод исследования данного показателя – это способ с применением стандартной сыворотки. Эта диагностика определяет общепринятые антигены по системе АВО.

Изогеммагглютинирующая сыворотка представляет собой совокупность специальных антител к наружным частичкам эритроцитов. Если находится совместимый антиген, на который могут воздействовать антитела, то формируется комплекс, способствующий началу иммунно-защитного механизма. Вследствие этого происходит склеивание эритроцитарных клеток крови (агглютинация). Если подобное происходит, то делается вывод о несовместимости крови.

Данные сыворотки изготавливаются из крови доноров по специальной системе, подразумевающая под собой извлечение плазмы, в которой и содержать антитела, после чего ее разводят изотоником – хлорид натрия, это проходит в несколько этапов:

  • В емкость наливают 1 мл воды, в которой растворено 0,9% обычной соли.
  • В эту же пробирку вносят такое же количество разведенной плазмы.
  • Затем 1 мл данной жидкости вносят в емкость с изотоником.

Процесс позволяет получить соотношение 1:256. Если методика разведения будет нарушена, то есть большая вероятность получения ошибочных результатов.

Проведение исследования

На поверхность планшета наносится 0,1 мл каждой сыворотки в район, где нанесена нужная пометка. За тем берется исследуемая кровь объемом 0,01 мл для каждого образца. И затем проводится смешивание каждой капли сыворотки с кровью.

Спустя пять минут проводят диагностику. Тестирование считается положительным, если прошла реакция агглютинации. Исходя из результатов анализов, выполняется построение таблицы, в которую они и заносятся.

Таблица результатов теста на группу крови с применением стандартных сывороток.

Методика перекрестных реакций

В этом случае, чтобы определить агглютиноген используют цоликлоны. Иначе стандартные сыворотки с технологией параллельного выяснения благодаря эталонным эритроцитарным клеткам.

Два этих способа весьма сходны между собой. Но различия все, же есть.

На поверхность, на которую предварительно помещаются различные сыворотки, наносят по небольшой капле обычных эритроцитов. Затем кровь разделяют на фракции при помощи центрифуги. И форменные элементы добавляют к стандартным сывороткам, а плазменную часть – к стандартным эритроцитарным клеткам. Оценивание результатов проводят через пять минут и показатели отмечают в таблице.

Благодаря данной методике исключаются ошибки при исследовании.

Метод с использованием цоликлонов

Если нет возможности определить группу крови стандартными сыворотками, то используют данную методику.

Цоликлоны – гибридные антитела, которые получают из в-лимфоцитов крови мышей.

Последовательность проведения диагностики такая:

  1. После нанесения отметок на планшет, которые соответствуют виду цоликлона, наносится раствор.
  2. К каждому образцу цоликлона вносят одну каплю диагностированной крови.
  3. Оценка результатов через пять минут.
  4. Для данной методики необходимо соблюдать специальные условия. Они включают в себя пригодность цоликлонов, температуру в помещении и уровень влажности.

Результаты анализов считаются позитивными в том случае, когда при смешивании данных фракций наблюдается реакция агглютинации. Если подобное произошло в двух образцах, то считается, что кровь относится к четвертой группе. Если реакция не наблюдается вовсе, то к первой. Диагностические ошибки в данной методике встречаются не часто.

Быстрый способ «Эритротест»

Выше перечисленные способы используются в медицине уже долгое время и распространены по всему миру. Но ввиду того, что отрасль постоянно развивается, вводятся быстрые диагностические методы по установлению принадлежности к группе крови. Таким нововведением считается и «Эритротест».

Чтобы определить показатель данным способом необходимо иметь следующее оборудование:

  • Стандартный планшет с пятью лунками
  • Скарификатор для прокола и получения биологической жидкости
  • Стеклянная пипетка с резиновой грушей
  • Пипетка для забора реактивов
  • Палочки для смешивания компонентов

Основное преимущество эритротеста состоит в том, что исследование не требует дополнительных условий и доступно в тот момент, когда проведение стандартной диагностики невозможно. Последовательность проведения В углублениях планшета размещают цоликлоны к антигенам поверхностного типа и основному, который отвечает за наследственную передачу резус-фактора. В последнюю лунку добавляют контрольную сыворотку, которая исключит ошибочный результат и верно укажет на принадлежность к той или иной группе.

Оценивание результатов анализа проводится с помощью таблицы, в ней указываются возможные результаты тестирования.

Классификация по системе АВО

Группа крови, определение ее проводится исходя из специально разработанных норм. Существует определенная таблица, которая характеризует каждую группу крови.

Группы Описание
I (0) Эритроцитарные антигенные качества не наблюдаются
II (А) Присутствие антигена А
III (В) Наличие на поверхности эритроцитарных клеток антигена В
IV (АВ) Присутствие обоих антигенов

Видео: Методы определения групп крови:

ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС ПРИНАДЛЕЖНОСТИ КРОВИ С ПОМОЩЬЮ ЦОЛИКЛОНОВ 6-7

ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС-ПРИНАДЛЕЖНОСТИ КРОВИ С ПОМОЩЬЮ СТАНДАРТНЫХ СЫВОРОТОК

Понятие резус-фактор — слишком общее (и устаревшее). Система резус антигенов многообразна. Современные методы исследования позволяют делать тесты индивидуально по резусу D, С, с, Е, е. Кроме этого, необходимо выявлять случаи со слабым D-антигеном или вариабильным D-антигеном. Вся эта информация тоже крайне важна при подборе донора в случае необходимости.

Ход работы. Определение резус-принадлежности крови проводится с помощью стандартной универсальной сыворотки «антирезус» для всех групп крови. В пробирку вводят одну каплю (0,05 мл) исследуемой  крови   или  эритроцитов   и  добавляют   1—2  капли  стандартного универсального реагента «антирезус» той же группы крови. Перешивают    содержимое    путем    встряхивания    пробирки и помещают ее на водяную баню на 5 минут при температуре 370С, так как иммунная реакция с антигеном требует оптимальной температуры.   Как правило, агглютинация наступает в течение 3-5 мин.  По истечении этого времени  для исключения неспецифической агрегации эритроцитов в пробирку добавляют 2—3 мл изотонического раствора хлорида натрия и перемешивают  (но взбалтывая!), 2—3 раза переворачивая пробирку. 

В некоторых случаях не представляется возможным определение резус-принадлежности реципиента, тогда пользуются индивидуальной пробой на резус-совместимость крови донора и реципиента.

На чашку Петри наносят 2 капли сыворотки крови больного и маленькую каплю переливаемой крови, их смешивают и ставят на водяную баню (42-45 °С) на 10 мин. Если наступила агглютинация, то кровь донора несовместима с кровью реципиента и ее переливать нельзя.

Трактовка результатов. Пробирки просматривают на свет невооруженным глазом. При положительном резуль­тате агглютинация выражается в появлении хлопьев из склеенных эритроцитов на фоне просветленной жидкости. При отрицательном результате жидкость в пробирке остается равномерно окрашенной, без признаков агглю­тинации эритроцитов. Результат учитывают как истинный после проверки контрольных, образцов, т. е. при поло­жительном результате со стандартными резус-отрицательными эритроцитами, одногруппными с исследуемой кровью. 

 ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС ПРИНАДЛЕЖНОСТИ КРОВИ С ПОМОЩЬЮ ЦОЛИКЛОНОВ

 Цоликлоны изготавливаются из асцитной жидкости мышей  – носителей анти-D и анти-С гибридом. Цоликлоны Анти-D, Анти-С, Анти-с предназначены для определения резус принадлежности крови.

Ход определения. На планшет индивидуальными пипетками наносятся цоликлоны Анти-D, Анти-С, Анти-с по одной большой капле (0,1мл). Рядом с каплями антител наносится по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01 мл). Кровь смешивается с реагентом. Наблюдается ход реакции с цоликлонами визуально при легком покачивании планшета в течение  трех минут. Агглютинация эритроцитов с цоликлонами обычно наступает в первые 3-5 сек., но наблюдение следует вести 3 минуты ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности резус-антигена. При использовании цоликлонов термостатировать не требуется, 

Интерпретация результатов. Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.

Наличие агглютинации с Анти-D, Анти-С или Анти-с цоликлонами свидетельствует о том, что кровь резус-положительная, а отсутствие агглютинации – что кровь резус-отрицательная.

image

Поделиться:

Вас могут заинтересовать другие наши публикации:

30417 3

Оцените статью
Рейтинг автора
5
Материал подготовила
Врач терапевт высшей категории
Написано статей
164
А как считаете Вы?
Напишите в комментариях, что вы думаете – согласны
ли со статьей или есть что добавить?
Добавить комментарий