Значение слова ГРАНУЛОЦИТЫ в Большой советской энциклопедии, БСЭ

Гранулоциты — это форменные клетки крови, наиболее многочисленный подвид белых кровяных телец. В структуре жидкой соединительной ткани их насчитывается до 80%. Основная задача таковых — защита организма от негативного влияния извне, обеспечение стабильной работы иммунитета.По своему характеру гранулоциты (GRA или Gran) неоднородны и представлены тремя типами клеток: базо-, нейтро- и эозинофилами. Все они выполняют определенные задачи, что соответствует их структуре и численности в общей массе.Изменение концентрации форменных клеток сказывается на самочувствии и состоянии здоровья также не сразу, а постепенно. В зависимости от конкретного клинического случая.Лечение необходимо не всегда, все меры принимаются по показаниям. Роль клеток в организмеЕсть большая группа функций гранулоцитов. Если говорить обобщенно и безотносительно конкретного подвида.Первичное реагирование на аномальные агенты извне. Названные структуры выступают начальной линией обороны тела. Они отвечают быстрее прочих, что обусловлено их большим количеством.А учитывая неприхотливость к концентрации питательных веществ и кислорода, общую живучесть и автономность, становится понятно, почему они столь эффективны. Эта роль возложена и на прочие клетки, которые не так оперативно реагируют на угрозы.Создание барьера для недопущения проникновения агентов в ткани и органы. Гранулоциты разных видов не допускают транспортировки бактерий и вирусов в структуры тела человека. Создают своеобразную защиту, пока прочие обеспечивают уничтожение угрозы.Сигнальная функция, обнаружение и сообщение об аномальном агенте всем структурам иммунной системы. Посредством специальных механизмов клетки-гранулоциты оповещают (говоря условно) прочих о текущем состоянии, угрозе. Это обеспечивает еще большее ускорение работы защитных сил, их мобилизацию на ликвидацию пагубной микрофлоры.Ингибирование (замедление) репликации вируса или же уничтожение бактериального агента. Инфекционные возбудители разнородны по своему строению, общей структуре, функциональным возможностям, агрессивности и поведению в среде человеческого организма.Гранулоциты действуют в зависимости от конкретного типа возбудителя, подстраиваясь под его особенности. Они способны замедлить репликацию (копирование себе подобных экземпляров) вирусов, разрушают цитоплазматические мембраны бактерий, создавая для них невыносимые условия для дальнейшего существования.Нейтрофилы считаются наиболее многочисленной группой гранулоцитов, потому основные функции по непосредственной защите организма ложатся именно на них.Базофилы и эозинофилы выполняют идентичную работу, но несколько по-другому. Тем самым зернистые лейкоциты (другое название гранулоцитов) обеспечивают всестороннюю защиту организма в динамическом, постоянном режиме.Таблицы нормОценка проводится, преимущественно, по наиболее многочисленной группе клеток рассматриваемого типа — нейтрофилам (NEUT). Норма определяется как процентная концентрация в лейкоцитарной формуле.Соответственно выделяют следующие адекватные показатели.У женщинВозраст (лет)Уровень нейтрофилов в пропорции (%)11-16Около 60%16-21Порядка 70%21-3565-70%36-5063-67%50-6553-57%Старше 6553-57%У мужчинВозраст (лет)Уровень нейтрофилов в пропорции (%)10-1540-60%16-2155-60%22-3655-60%36-5063-65%50-6563-65%После 6555-60%У детейВозрастУровень нейтрофилов в пропорции (%)Рождение61-63%1 месяц35-38%6 месяцев32-39%1 год31%2-5 лет33-36%5-8 лет51-52%8-10 лет53-65%10-16 лет57-59%16-18 лет57-59%Если говорить о самих гранулоцитах (GRA), то нормы по возрастам выглядят следующим образом:ВозрастПоказатели (число клеток x10⁹ на литр крови)Появление на свет6.1-26.0До окончания 1-х суток5.0-20.51 нед.1.5-9.82 нед.1.1-9.01 мес.1.0-9.0До полугода1.0-8.51 год1.5-8.72 года1.5-8.54 года1.5-8.56 лет1.5-8.18 лет1.5-7.912 лет1.8-8.213-18 лет1.6-8.118-25 лет1.8-7.526-501.5-7.726-501.5-7.5Старше 601.5-7.6 Нужно иметь в виду, что это усредненные показатели. Интерпретация проводится индивидуально, в зависимости от массы критериев. В том числе общего состояния здоровья, питания накануне, сиюминутного положения вещей, также допускаются отклонения в каждом конкретном случае.Не стоит забывать и о референсных значениях, которые применяются различными лабораториями, они зависят от способа исследования концентрации форменных клеток.Все изменения требуют обязательной квалифицированной оценки специалистом на месте. Не всегда отклонения говорят однозначно в пользу патологического процесса.Остальные показатели, такие как базо- и эозинофилы рассчитываются, как правило, по стандартным методикам и оцениваются в общем анализе крови.Физиологичесикие причины повышения GRAИзменение показателя гранулоцитов в сторону увеличения обычно свидетельствует в пользу воспалительного процесса. Но не всегда. Есть группа естественных факторов.Среди таковых:Беременность. В особенности гестация в первом триместре. Ближе к концу периода вынашивания плода возможен резкий скачок показателя гранулоцитов, что не несет какой-либо опасности для женщины. Однако в большинстве своем врачи справедливо стремятся обследовать пациентку. В профилактических целях.Приближение менструального цикла. Чем скорее начало, тем вероятнее рост уровня гранулоцитов. Хотя это не аксиома. Возможно увеличение показателя у одной женщины попеременно — то есть, то нет. Это нормальный, физиологичный вариант.Норма гранулоцитов в крови смещается сразу после интенсивной физической нагрузки. Потому перед исследованием рекомендуется 4-5 часов сохранять покой. Результаты, полученные в нарушение указанного условия, заранее считаются ложными, необходимо повторение диагностики.То же самое касается обильного приема пищи. Кровь сдают натощак, поскольку даже легкий завтрак способен изменить картину по гранулоцитам. Увеличив концентрацию клеток. Но опять же ложно.Не стоит брать анализ сразу после родов, поскольку деятельность по разрешению создает искусственный рост уровня форменных клеток.Причины связанные с заболеваниямиПатологических причин роста концентрации гранулоцитов как минимум столько же.Острые инфекционные процессы. Бактериальные или вирусные поражения. Преимущественно растет концентрация нейтрофилов. Прочие цитологические структуры реагируют в меньшей мере.Аутоиммунные воспаления. Любой локализации и независимо от происхождения. Наиболее активно проявляют себя такие расстройства, как артрит, васкулит. Также некоторые другие нарушения. Обнаруживается рост тех же самих клеток — нейтрофилов.

• 
• 

• 
• 

Глистные поражения. Инвазии паразитарного характера сказываются на картине крови не сразу, а как только число чужеродных организмов достигает определенного количества. При этом есть множество сторонних симптомов. Которые свидетельствуют в пользу патологического процесса.Аллергические реакции. Как ни странно, кровь реагирует и на иммунный ответ изначально ложного характера. Как в этом, так и в предыдущем случае, растет уровень базо- и эозинофилов. Насколько — зависит от сложности патологического процесса.Интоксикации организма иного рода. Солями металлов, летучими веществами и так далее.Расстройства работы костного мозга.Прием некоторых лекарственных средств. Сюда относят противовоспалительные в неумеренных количествах, антибиотики и прочие медикаменты. Список таковых довольно широкий. Изменения в картине крови почти всегда указываются в аннотации.Неопластические процессы. Опухоли. Злокачественные (намного чаще) или доброкачественные.Есть и более редкие причины, которые обнаруживаются случайно или же времени на анализ нет вообще. Сюда относят, например, острые внешние и внутренние кровотечения.После стабилизации состояния, изменения в концентрации гранулоцитов сохраняются на протяжении некоторого времени. Нескольких суток после коррекции расстройства.Патологии сердечно-сосудистой системы. В том числе миокардит, инфаркт, и прочие изменения.Повышение гранулоцитов у взрослых требует обязательной диагностики, поскольку ситуация неочевидна.Общего исследования крови недостаточно. Эта методика подходит разве что для констатации факта наличия нарушения. Понадобятся инструментальные способы.Внимание: Если незрелые гранулоциты повышены — это значит, что поражен костный мозг, в таком случае затягивать с обследованием нельзя.Причины снижения GRA в анализе кровиФакторы падения концентрации гранулоцитов малочисленны и встречается такой процесс в целом не так часто.Если говорить о конкретных причинах:Вирусные поражения организма. Герпес, грипп и другие варианты.Анемии  и заболевания крови прочего рода.Врожденные или приобретенные нарушения со стороны нормального кроветворения.Если гранулоциты понижены — это однозначный сигнал расстройства работы системы. С другой стороны, вариантов патологии не так много, как в предыдущем случае, потому обнаружить причину проще.Дополнительные обследованияДиагностика проводится под контролем гематолога. Одного только общего анализа недостаточно для получения полноценной картины. Необходимы некоторые другие способы.К таковым относятся:Опрос больного. Нужно выявить все возможные жалобы на самочувствие, чтобы понять, какова клиническая картина.Сбор анамнеза. Оценка вероятного происхождения изменений. Установлению подлежат текущие и перенесенные ранее отклонения, образ жизни, привычки, характер профессиональной деятельности, контакты с инфицированными лицами и прочие моменты.Расширенное исследование крови. К гранулоцитам относятся три типа клеток, измерение проводится по каждому одновременно. Это дает больше информации. Также необходим биохимический анализ.Оценка состояния организма. Проводится в зависимости от предполагаемой локализации первоисточника патологического процесса. Будь то суставы, пищеварительный тракт, опухоли и многие другие факторы.При вероятности развития расстройств со стороны костного мозга, системы кроветворения, обязательно проводится пункционная биопсия. С дальнейшей гистологической оценкой состояния клеток, их структуры и функции. Это основная методика в таком случае.Вопрос диагностики решается по усмотрению специалиста. При грамотном подходе суть изменений удается обнаружить в считанные дни, максимум недели.Возможно, в процессе обследования перечень мероприятий будет расширен, чтобы получить дополнительную информацию.Методы леченияИзменения показателя Gran в анализе крови требует коррекции в зависимости от ситуации. Вопрос решается в индивидуальном порядке после полной диагностики.При повышенных показателяхИспользуются препараты нескольких групп:Антибактериальные средства. Широкого спектра действия. Желательно назначать после бак. посева, чтобы оценить чувствительность агента к тому или иному медикаменту. Неэффективно такое лечение при вирусном поражении.В случае другого септического расстройства применяют наименования, ускоряющие синтез интерферона.При инфекционном процессе используют противовоспалительные, жаропонижающие.После коррекции первичного отклонения, концентрация гранулоцитов приходит в норму самостоятельно.При развитии аутоиммунного воспаления необходимо применение глюкокортикоидных средств (Дексаметазон, Преднизолон), иммуносупрессоров, если в этом есть потребность. Для снижения интенсивности ответа защитных сил организма пациента.Опухоли устранятся оперативными методами. При злокачественном поражении обязательна лучевая и/или химиотерапия.Применение конкретных способов определяется целесообразностью.При пониженных значенияхВстречается этот вариант не так часто. Задача заключается в устранении первичного процесса, провоцирующего нарушение. Применяются антибиотики при воспалении, стимуляторы иммунитета, прочие.Анемические процессы устраняются посредством введения препаратов железа (при железодефицитной анемии) или витаминов: B9, B12 в зависимости от формы расстройства.ПрогнозВ основном — благоприятный. Изменение концентрации гранулоцитов не влияет на состояние здоровья и продолжительность жизни как таковые. Вопрос нужно решать, исходя из конкретного первичного диагноза. Единственную опасность представляют опухоли и злокачественные заболевания крови, костного мозга.Гранулоциты обеспечивают нормальную работу иммунной системы. Все изменения показателя требуют квалифицированной медицинской оценки, под контролем гематологом проходит диагностика.При необходимости лечения возможно привлечение прочих специалистов. Вопрос многогранный. Однако при своевременной помощи прогноз всегда благоприятный.

Оглавление: 

Гранулоциты – это группа белых клеток, в цитоплазме которых содержатся гранулы. Их еще называют зернистыми лейкоцитами. К гранулоцитам относятся нейтрофилы, базофилы и эозинофилы. Они составляют около 60% от всех белых кровяных клеток. Самая многочисленная группа – нейтрофильные гранулоциты, меньше всего в крови базофилов.

Вырабатываются эти клетки в костном мозге из клеток-предшественниц, которые делятся в течение четырех дней, затем происходит морфологическое дозревание, на которое уходит пять дней. Как только гранулоциты выходят в кровяное русло, сразу делятся на пристеночные (временно прилипающие к стенкам сосудов) и активно циркулирующие. В крови они находятся около одной недели, после выхода в ткани живут около двух суток.

Гранулоциты содержат в цитоплазме большое количество гранул, из-за чего клетки и получили свое название

Виды гранулоцитов

Гранулоциты делят на нейтрофильные, базофильные и эозинофильные в зависимости от того, как они воспринимают стандартные красители. Размер этих клеток составляет 9-12 мкм.

Нейтрофилы – самая многочисленная группа зернистых лейкоцитов. Их название связано с тем, что по методу Романовского они окрашиваются как основным красителем, так и кислым (эозином). Зрелые нейтрофильные гранулоциты являются полиморфноядерными клетками, поскольку их ядро состоит из четырех-пяти сегментов. В крови у здорового человека циркулируют в основном зрелые сегментоядерные формы и небольшое количество палочкоядерных гранулоцитов.

Эозинофилы получили свое название в связи с тем, что окрашиваются только кислым красителем (эозином) и не поглощают основной. Их ядро состоит из двух долей.

Функции нейтрофилов

Нейтрофилы способны активно передвигаться, могут перемещаться за пределы кровеносных сосудов. Преимущественно они двигаются к месту воспаления. Нейтрофилы могут осуществлять фагоцитоз, но способны поглощать только небольшие частицы, поэтому их относят к микрофагам. После поглощения чужеродных клеток они погибают, при этом освобождается большое количество активных веществ, которые приводят к повреждению вредных микроорганизмов, усиливают воспалительные процессы и передвижение иммунных клеток к очагу инфекции.

Из нейтрофилов, тканей, разрушенных в результате воспаления, и микроорганизмов, которые этот процесс вызвали, образуется масса, которая всем известна как гной. Главная функция этих гранулоцитов – защита от грибковой и бактериальной инфекции. Значительно меньше они защищают от вирусов и не принимают участия в защите от гельминтов и опухолей. При острых бактериальных инфекциях самый первый иммунный ответ – нейтрофильный. Он всегда опережает специфический лимфоцитарный. В то же время при хронических процессах роль нейтрофилов невелика, в этом случае преобладает лимфоцитарный ответ.

Функции базофилов

Функции эозинофилов

Эозинофильные гранулоциты способны активно передвигаться и проникать за пределы кровяного русла. Их можно назвать фагоцитами, хотя фагоцитоз не является их главной функцией. Они могут поглощать только мелкие клетки, поэтому относятся к микрофагам. Они обладают цитотоксическими свойствами, поэтому их основная функция – участие в противопаразитарном иммунитете. Они поглощают и связывают гистамин и другие медиаторы воспаления и аллергии. Как и базофилы, могут высвобождать эти вещества. Таким образом, эозинофильные гранулоциты способны и подавлять аллергическую реакцию, и выполнять про-аллергическую функцию.

Базофилы повышаются в крови при аллергии

Норма гранулоцитов

Содержание гранулоцитов определяют во время общего анализа крови, подсчитывают как абсолютное количество, так и относительное.

Норма гранулоцитов для взрослых мужчин и женщин составляет от 1,2 до 6,8Х10⁹ на литр крови. Относительное содержание (процент от общего количества лейкоцитов) – от 47 до 72 %.

Повышенные гранулоциты при беременности считаются физиологической нормой, однако если их уровень высок и продолжает расти, велика вероятность развития патологии. О причинах повышения лейкоцитов при беременности можно прочитать здесь.

Почему повышены гранулоциты?

Еще советуем:Почему бывают понижены базофилы в крови?

Причины повышения гранулоцитов могут быть разными. Чаще всего они повышены в связи с воспалительными процессами, происходящими в организме. К наиболее частым можно отнести:

• острые инфекционные заболевания;
• паразитарные инфекции;
• заболевания, сопровождающиеся некротическими процессами;
• интоксикации;
• злокачественные опухоли;
• недавно перенесенное инфекционное заболевание;
• прививки;
• прием некоторых медикаментов;
• аллергии.

Нейтрофилез обусловлен следующими факторами:

• острые бактериальные инфекции;
• интоксикации эндогенные и экзогенные;
• острые геморрагии;
• миелопролиферативные заболевания;
• прием лекарственных препаратов.

Так выглядит нейтрофилез в мазке крови

Эозинофилия указывает на развитие:

• паразитраных заболеваний;
• аллергических реакций;
• опухолей;
• непаразитарных инфекций;
• кожных заболеваний;
• иммунных болезней;
• эндокринных нарушений;
• патологий сердца;
• системных болезней соединительной ткани.

Причины базофилии:

• язвенный колит и другие воспаления ЖКТ;
• синдром Ходжкина;
• аллергия;
• болезни крови;
• гемолитическая анемия;
• прием медикаментов.

Заключение

Зернистые лейкоциты выполняют в организме взрослых и детей важную роль – осуществляют защиту организма преимущественно при заражении бактериальными, грибковыми, паразитарными инфекциями, а также принимают участие в формировании аллергических реакций. Если уровень гранулоцитов в крови повышен, значит, в организме развивается инфекция. Содержание этих клеток оценивается всегда в совокупности с другими показателями.

Возможно, вас заинтересует: Что такое WBC в анализе крови? Похожие статьи Основные причины снижения гранулоцитов в крови Что значит, если повышены незрелые гранулоциты? Как называются клетки крови

Во время химиотерапии у пациента обычно возникают осложнения разной степени выраженности. Опытный врач обязательно объяснит, как избежать побочных эффектов лечения или снизить их интенсивность, но есть вещи, о которых нужно помнить всегда.

Нейтропения — это снижение количества циркулирующих в крови нейтрофилов, подвида лейкоцитов (белых кровяных клеток), которые отвечают за непосредственный контакт с инфекционным возбудителем и его уничтожение. Другими словами, нейтрофилы — это защита нашего организма.

Нейтропения при химиотерапии возникает из-за повреждения быстроделящихся клеток костного мозга и, как следствие, недостаточного количества нейтрофилов в крови. В целом это нормальный процесс — костный мозг восполняет дефицит, но глубина и длительность нейтропении зависит от множества факторов: в большей степени от режима химиотерапии, возраста пациента и его сопутствующей патологии.

Количество нейтрофилов обычно начинает снижаться примерно через неделю после начала каждого цикла химиотерапии. Уровень нейтрофилов достигает нижней точки через 7-14 дней после лечения. Это явление носит название «надир» и является точкой наибольшего риска по развитию инфекции. Затем количество нейтрофилов снова начинает расти — костный мозг возобновляет нормальную выработку нейтрофилов. Но для достижения нормального уровня может потребоваться 3-4 недели.

Снижение абсолютного числа нейтрофилов (АЧН) ниже 0,5 тыс/мкл (нижний порог нормы 2 тыс/мкл) чревато риском развития инфекции, в том числе и тяжелой. И чем старше пациент, тем выше риск.

Одно из самых важных и потенциально опасных осложнений химиотерапии — фебрильная нейтропения. Ее можно избежать, если знать, что делать.

При нейтропении системная реакция организма на инфекцию чаще всего сначала ограничена лихорадкой. Вот почему важно регулярно сдавать общий анализ крови в процессе химиотерапии и следить за температурой тела. Если при химиотерапии возникло повышение температуры выше 38°C на фоне снижения АЧН ниже 0,5 тыс/мкл, нужно незамедлительно сообщить об этом лечащему врачу, начать лечение антибиотиками широкого спектра и гранулоцитарными колониестимулирующими факторами.

Ранее считалось, то все пациенты в таком состоянии должны быть госпитализированы. Сегодня есть определенные прогностические калькуляторы, которые определяют возможность лечиться амбулаторно, но с четкими рекомендациями по мониторингу состояния.

Фебрильная нейтропения — это опасное состояние, которое без лечения может осложниться сепсисом и даже летальным исходом.

Быстрые факты о нейтропении

1. Нейтропения может угрожать жизни.

В России статистика по нейтропении, возникающей вследствие проведения химиотерапии, не ведется. Но в США, где анализируют эти данные, нейтропения становится причиной госпитализации 60 000 онкологических пациентов ежегодно. Каждый 14-й пациент умирает от осложнений, связанных с этим состоянием.

2. Дни повышенного риска.

Нейтропения может развиться через 7-12 дней после начала каждого цикла химиотерапии.

3. Почему вы находитесь в зоне риска развития нейтропении?

Химиотерапия убивает как ненормальные (раковые), так и нормальные (в том числе ответственные за иммунитет) клетки в вашем организме. Когда это случается, риск развития инфекционного заболевания увеличивается.

4. Инфекции при нейтропении могут быстро прогрессировать.

Контролируйте температуру тела. Немедленно свяжитесь с врачом, если на фоне химиотерапии у вас поднялась температура выше 38°С.

Если предполагается госпитализация, обязательно сообщите врачам, что у вас онкологическое заболевание и вы проходите химиотерапию.

5. Как вы можете предотвратить инфекцию:

• чаще мойте руки;
• поговорите с врачом о необходимости вакцинации от гриппа;
• принимайте ванну или душ каждый день, используйте нейтральный (без отдушек) лосьон для тела, чтобы снизить риск сухости кожи и появления на ней трещин;
• спросите своего врача, что нужно делать, если количество белых кровяных телец (лейкоцитов и, самое главное, — нейтрофилов) сильно снизится.

Абсалямов Руслан Ильдарович врач-онколог

Биоматериалы

• Гематологические исследования

  • Клинический анализ крови

400.001 деньКровь (ЭДТА)

Общий клинический анализ крови – самый распространенный анализ, сдавать который приходилось каждому человеку. Общий анализ крови широко используется как один из самых важных методов обследования при большинстве заболеваний,

подробнее… В корзинуГемоглобин120.001 деньКровь (ЭДТА) Гемоглобин (Hb, hemoglobin) – основной компонент эритроцитов (красные кровяные тельца крови), представляет собой сложный белок, состоящий из гемма (железосодержащая часть Hb) и глобина (белковая часть Hb). подробнее… В корзинуЭритроциты80.001 деньКровь (ЭДТА) Эритроциты – (красные кровяные тельца, red blood cells, RBC) – наиболее многочисленные форменные элементы крови, содержащие гемоглобин, транспортирующие кислород и углекислый газ. Образуются из ретикулоцитов по выходе их из костного мозга. подробнее… В корзинуСОЭ скорость оседания эритроцитов, метод Вестергрена80.001 деньКровь (ЭДТА) Скорость оседания эритроцитов (СОЭ, Erythrocyte sedimentation rate, ESR) – показатель скорости разделения крови в пробирке с добавленным антикоагулянтом на 2 слоя: верхний (прозрачная плазма) и нижний (осевшие эритроциты). подробнее… В корзинуЛейкоцитарная формула150.001 деньКровь (ЭДТА) Лейкоцитарная формула (Differential White Blood Cell Count, лейкограмма) – это процентное соотношение различных видов лейкоцитов. По морфологическим признакам (вид ядра, наличие и характер цитоплазматических включений) выделяют 5 основных видов лейкоцитов: подробнее… В корзинуРетикулоциты150.001 деньКровь (ЭДТА) Ретикулоциты – молодые формы эритроцитов (предшественники зрелых эритроцитов), содержащие зернисто-нитчатую субстанцию, выявляемую при специальной (суправитальной) окраске. подробнее… В корзинуГемосиндром250.001 деньКровьподробнее… В корзину

Иммуногематологические тесты

Общеклинические исследования

• Исследования мочи

• Исследование кала

• Цитологические исследования

• Исследование отделяемого мочеполовых путей (женское)

• Исследование отделяемого мочеполовых путей (мужское)

Биохимия крови и мочи

• Ферменты

• Белково-азотистый обмен

• Пигменты

• Макро- и микро элементы

• Углеводный обмен, диагностика сахарного диабета

• Печеночный профиль

• Липидный профиль

• Биохимические исследования мочи

Иммунный статус, аллергодиагностика

• Иммунный статус

• Аллергодиагностика

• Индивидуальные аллергены

Коагулологические исследования

Гормоны, онкомаркеры, витамины

• Гормоны щитовидной железы

• Гипофизарно-надпочечниковая система

• Маркеры метаболизма костной ткани и остеопороза, обмен кальция и фосфора

• Витамины

• Соматотропная функция гипофиза

• Диагностика репродуктивной системы, мониторинг беременности

• Эстрогены и прогестины

• Оценка андрогенной функции

• Гормональная система регуляции обмена натрия и воды

• Онкомаркеры

Инфекции, вирусы, гельминты

• Диагностика ВИЧ инфекции

• Диагностика сифилиса

• Диагностика вирусных гепатитов

• Диагностика TORCH

• Инфекции мочеполовой системы (в том числе ИППП)

• Инфекции мочеполовой системы (в том числе ИППП), методом ПЦР

• Вирус Эпштейна-Барр

• Chlamydia pneumoniae, Mycoplasma pneumonia

• Хеликобактерная инфекция

• Боррелиоз

• Клещевой Энцефалит

• Лямблиоз

• Ротавирус

• Гельминты

• Определение а/т к ВИ-антигены сальмонелл тифа (РПГА)

Диагностика аутоиммунных заболеваний, маркеры воспаления

• Диффузные болезни соединительной ткани (ДБСТ)

• Ревматоидный артрит и поражения суставов

• Васкулиты и поражения почек

• Аутоиммуные поражения печени и ЖКТ

• Диагностика антифосфолипидного синдрома

• Аутоиммунные поражения щитовидной железы

• Маркеры воспаления

Вспомогательные процедуры

Получить результаты Вопрос-ответ Отзывы Вызов на дом Наши контакты Вакансии

Периферическая кровь или цельная кровь содержит различные клетки крови, такие как эритроциты (красные кровяные клетки), лейкоциты (белые кровяные клетки) и тромбоциты, взвешенные в плазме крови. Плазма состоит в основном из воды, но также содержит белки, глюкозу, ионы, гормоны и факторы свертывания крови. Удаление факторов свертывания из плазмы приводит к образованию сыворотки крови.

Наиболее распространенными клетками в крови являются эритроциты, в состав которых входит гемоглобин, железосодержащий белок. Гемоглобин обратимо связывает кислород и тем самым облегчает его транспортировку по организму.

Тромбоциты играют важную роль в восстановлении ран, так как они останавливают кровотечение путем слипания и свертывания крови в сосудах. Тромбоциты млекопитающих не имеют ядра. Они состоят из участков цитоплазмы, которые получают из мегакариоцитов в костном мозге до поступления в кровообращение. Примерно 25-40% тромбоцитов находятся в селезенке и высвобождаются по мере необходимости, а остальные свободно циркулируют в крови около десяти дней.

Наконец, различные подтипы лейкоцитов играют существенную роль в иммунном ответе.

Все клеточные компоненты крови происходят из гемопоэтических стволовых клеток (ГСК). Эти плюрипотентные клетки располагаются в костном мозге и дают начало специализированным клеткам-предшественникам с более ограниченным потенциалом: лимфоидным клеткам-предшественникам и миелоидным клеткам-предшественникам. В свою очередь лимфоидные клетки-предшественники дают начало Т-и В-лимфоцитам, а также и естественным киллерам (NK-клеткам), тогда как миелоидные клетки-предшественники дают начало моноцитам, дендритным клеткам и гранулоцитам (включая нейтрофилы, базофилы и эозинофилы). Наконец, эритроциты и тромбоцит-продуцирующие мегакариоциты, происходят от их общего предшественника.

Оглавление

1 Лейкоциты

Лейкоциты играют ключевую роль в иммунном ответе и поэтому представляют особый интерес для понимания механизмов баланса здоровья и болезни. Для проведения исследований часто требуется проводить выделение лейкоцитов из крови или ее продуктов. Классификация лейкоцитов может быть основана на их происхождении (миелоидные или лимфоидные) или на морфологии их ядра (мононуклеарные или полинуклеарные) и наличии или отсутствии гранул в их цитоплазме, что разделяет лейкоциты на две группы: 1) мононуклеарные клетки периферической крови (PBMCs, также известные как агранулоциты) и 2) полиморфноядерные лейкоциты (PMNs, также известные как гранулоциты).

1.1 Мононуклеарные клетки периферической крови (PBMCs)

PBMCs включают лимфоциты (Т, В и NK-клетки), моноциты и дендритные клетки. Т-и В-лимфоциты отличаются местом своего созревания и антигенными рецепторами. Т-клетки созревают в тимусе и экспрессируют Т-клеточный рецептор TCR, тогда как В-клетки созревают в костном мозге и несут В-клеточный рецептор BCR.

Тип клеток	% от PBMCs	Маркеры	Функция
CD4+ T клетки	25–60%	CD3+CD4+	Координируют адаптивный иммунитет через активацию и регуляцию других иммунных клеток
CD8+ T клетки	5–30%	CD3+CD8+	Уничтожают раковые клетки, инфицированные или поврежденные клетки
B клетки	5–10%	CD19+	Секретируют антитела как часть гуморального иммунного ответа
NK клетки	10–30%	CD56+ CD3—	Вызвают лизис или апоптоз инфицированных клеток
Моноциты	5–10%	CD14+	Захватывают чужеродные объекты посредством фагоцитоза, выполняют презентацию антигена и продуцируют цитокины
Дендритные клетки	1–2%	Процессинг и презентация антигенного материала Т-клеткам

1.2 Гранулоциты

Гранулоциты характеризуются наличием гранул в их цитоплазме и переменной формой ядра; отсюда и название — полиморфноядерные лейкоциты (PNMs). Нейтрофилы, эозинофилы и базофилы — это все гранулоциты, которые при активации высвобождают содержимое своих гранул. Нейтрофилы являются наиболее распространенными лейкоцитами крови и первыми реагируют на очаг воспаления, где они выполняют свою фагоцитарную функцию. Считается, что эозинофилы (также известные как ацидофилы) участвуют в нападении на многоклеточных паразитов, таких как черви. Базофилы связаны со многими специфическими воспалительными реакциями, особенно теми, которые вызывают аллергические симптомы. Базофилы содержат антикоагулянт гепарин, который препятствует слишком быстрому свертыванию крови, а также сосудорасширяющий гистамин, который способствует притоку крови к тканям.

2 Содержание лейкоцитов в крови и в продуктах крови

Наиболее часто используемый источник лейкоцитов-периферическая цельная кровь. Однако в качестве источников все чаще используются продукты крови, такие как лейкоцитарно-тромбоцитарный концентрат (Buffy Coat), лейкоциты из камеры системы удаления лейкоцитов (LRSC) и материал для лейкафереза, такой как Лейкопак (Leukopak®). Для некоторых направлений, например, исследования стволовых клеток, пуповинная кровь и костный мозг лучше подходят в качестве исходного материала. Количество и состав клеток различаются между кровью и различными продуктами крови. Поскольку к каждому прикладному или исследовательскому вопросу предъявляются особые требования в отношении количества и состава клеток, источник лейкоцитов должен быть выбран соответствующим образом.

Типы клеток, абсолютное количество, и встречаемость в цельной крови и ее продуктах

Цельная кровь	Buffy coat	LRSC	Лейкопак®
Эритроциты	Абсолютное кол-во	5×109  cells/mL	4×1011 cells/buffy coat	5×1010 cells/LRSC	8×109 cells/половина Лейкопак®
По отношению к PBMCs	2500	400	50	1.2
PBMCs	Абсолютное кол-во	2×106 cells/mL	1×109 cells/buffy coat	1×109 cells/LRSC	7×109 cells/половина Лейкопак®
По отношению к PBMCs	1	1	1	1
Лейкоциты	Абсолютное кол-во	5×106 cells/mL	2×109 cells/buffy coat	1×109 cells/LRSC	7×109 cells/половина Лейкопак®
По отношению к PBMCs	2.5	2	1	1

Средние частоты общего количества лейкоцитов в различных продуктах крови.

Цельная кровь	Buffy coat	LRSC	Лейкопак®
Общие T клетки	22.5±3.8%	53.8±6.1%	53.8±6.1%	54.5±12.4%
CD4+ T клетки	14.6±3.5%	24.4±6.6%	32.4±6.6%	31.9±6.4%
CD8+ T клетки	6.8±1.3%	10.8±4.6%	15.0±4.5%	17.1±8.1%
B клетки	5.2±2.3%	7.2±2.4%	11.3±3.3%	12.5±4.6%
Моноциты	8.4±1.3%	10.7±2.8%	20.3±5.7%	19.1±7.1%
NK клетки	4.4±2.4%	4.1±2.4%	10.2±4.0%	7.7±3.0%
CD3+CD56+ клетки	0.8±0.7%	1.4±2.1%	1.8±1.3%	4.3±7.1%
Эозинофилы	3.2±1.6%	1.3±0.8%	1.9±2.3%	1.1±0.9%
Нейтрофилы	53.8±6.1%	34.4±11.4%	2.9±1.7%	3.9±3.4%

Частоты (% популяции) клеток определяли методом проточной цитометрии с использованием 7-цветного набора для Иммунофенотипирования клеток человека; количество лейкоцитов и эритроцитов определяли на Sysmex ® XP-300. Цифры указывают на проценты ± стандартное отклонение (n ≥ 10).

2.1 Цельная кровь

Все основные популяции иммунных клеток можно обнаружить в наиболее естественном состоянии в свежеприготовленной периферической крови. Однако типичный образец цельной крови редко превышает 10 мл и часто может быть меньше, особенно если донором является ребенок. Большие объемы могут быть получены от здоровых доноров, но обычно на одно донорство берется не более 500 мл. Это значительно ограничивает частоту встречаемости редких клеток, которые могут быть выделены из цельной крови. Преимуществом цельной крови, как источника, является свежесть материала, что очень важно для работы с чувствительными клеточными популяциями, такими как, например, нейтрофилы.

Антикоагулянты обычно добавляются к крови для предотвращения свертывания. Гепарин, этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА) и цитрат являются одними из наиболее часто используемых добавок. Гепарин связывается с ингибитором фермента антитромбином III (АТ), что приводит к конформационным изменениям внутри белка АТ и в конечном счете к его активации. Активированный АТ инактивирует тромбин, фактор Ха и другие протеазы, участвующие в свертывании крови. ЭДТА сильно и необратимо хелатирует двухвалентные катионы, такие как Са2+, тем самым предотвращая свертывание крови. Наконец, цитрат также используется для связывания Ca2+.

2.2 Лейкоцитарно-тромбоцитарный концентрат (Buffy coat)

Лейкоцитарно-тромбоцитарный концентрат или Buffy coat -это фракция образца крови, содержащая лейкоциты после удаления эритроцитов и плазмы. После донорства мешок с 450-мл крови центрифугируют, в результате чего получают три фракции: I) плазму (верхняя фракция), ii) Buffy coat (промежуточная фракция) и ii) эритроциты (нижняя фракция). Как правило, банки крови интересуются только плазмой и эритроцитами. Поэтому эти части извлекаются из кровяного мешка. Оставшийся материал – это и есть Buffy coat, состоящий из концентрированных лейкоцитов и тромбоцитов с уменьшенным количеством эритроцитов и гранулоцитов, объем которого колеблется в диапазоне от 30 до 80 мл. Легкодоступный лейкоцитарно-тромбоцитарный концентрат является популярным источником PBMCs для исследований.

2.3 Лейкоциты из камеры системы удаления лейкоцитов (LRSC)

LRSC, также известный как buffy cone, является побочной фракцией клеток в процессе тромбоцитарного фереза, при котором тромбоциты отделяются и собираются из взятой крови для последующего переливания пациентам с нарушениями, связанными с тромбоцитами. Отделенная фракция тромбоцитов все еще содержит лейкоциты, которые должны быть удалены до переливания тромбоцитов, чтобы предотвратить проблемы с отторжением. С этой целью лейкоциты отфильтровываются лейкоредукцией и собираются в специальной камере — LRSC. Таким образом, LRSC содержит высокую плотность лейкоцитов с низкой концентрацией нейтрофилов.

2.4 Leukopak®

Хорошим источником большого количества лейкоцитов являются коммерчески доступные Лейкопаки®. Это обогащенный продукт лейкафереза, собранный из периферической крови и состоящий из различных клеток крови, включая моноциты, лимфоциты и эритроциты. Соотношение лейкоцитов и эритроцитов низкое (в среднем 1:1), как и количество гранулоцитов. Коммерческие Лейкопаки® выпускаются в нескольких стандартных размерах, начиная от целого Лейкопака® до размеров ½ и ¼. Хотя количество PBMCs в Лейкопаке® является переменным, оно обычно остается в определенном диапазоне.

В некоторых случаях донорам вводят G-CSF (гранулоцитарный колониестимулирующий фактор), чтобы индуцировать выработку лейкоцитов и вызвать миграцию стволовых клеток из костного мозга в кровь. Таким образом, мобилизованные Лейкопаки® имеют более высокое количество лейкоцитов по сравнению с иммобилизованными Лейкопаками®, и частоты различных подтипов PBMC также различаются. Большинство Лейкопаков® получают от здоровых доноров, но также можно запросить Лейкопакс® для некоторых заболеваний, таких как аллергия и диабет.

3 Пуповинная кровь как источник лейкоцитов

Пуповинная кровь остается в плаценте и пуповине после рождения и собирается для сохранения стволовых клеток, которые могут быть использованы при лечении гемопоэтических и генетических нарушений. Пуповинная кровь содержит все компоненты цельной крови, включая лейкоциты, а также богата CD34+ гемопоэтическими стволовыми клетками. Несмотря на то, что количество CD34+ клеток сильно варьируется от донора к донору, обычно можно собрать от 1 до 4 миллионов CD34+ клеток с одной пуповины. Пуповинная кровь все чаще используется на экспериментальной основе в качестве альтернативного источника стволовых клеток, которые в противном случае получают из костного мозга.

4 Костный мозг как ресурс лейкоцитов

Костный мозг (КМ) – это полутвердая ткань, расположенная в губчатых частях костей и являющаяся основным местом кроветворения. Помимо костномозговой жировой ткани и поддерживающих стромальных клеток, КМ содержит мезенхимальные (МСК) и гемопоэтические стволовые клетки (ГСК). ГСК дают начало различным клеткам крови, включая лейкоциты. МСК дифференцируются в клетки скелетных тканей, включая клетки хрящей (хондроциты), костные клетки (остеобласты) и жировые клетки (адипоциты). Мононуклеарные клетки КМ, которые включают лейкоциты, а также стволовые и прогениторные клетки, можно отделить от эритроцитов и гранулоцитов путем центрифугирования в градиенте плотности.

Скачать PDF: Isolation of mononuclear cells from human bone marrow aspirates by density gradient centrifugation (special protocol)

5 Пробоподготовка крови

Для выделения клеток-мишеней можно использовать непосредственно цельную кровь. Однако в некоторых случаях использование именно фракции PBMC в качестве стартового материала для выделения определенного типа клеток может быть более эффективным.  PBMCs могут быть получены из цельной крови путем центрифугирования в градиенте плотности или путем лизиса эритроцитов, хотя последний способ считается “быстрым и грязным” методом.

В наиболее распространенном методе центрифугирования, с использованием градиента плотности используется раствор высокомолекулярных полимеров сахарозы Ficoll Paque® (Фиколл). Образец крови центрифугируют в пробирке, содержащей фиколл, чтобы разделить его компоненты в соответствии с их плотностями. Эритроциты имеют более высокую плотность, чем плазма, и поэтому оседают в нижней части пробирки и могут составлять до 45% от общего объема (в крови от здоровых доноров). Этот процент объема известен как гематокрит. Лейкоциты и тромбоциты образуют узкий слой с кольцом непосредственно над эритроцитами. Как уже упоминалось ранее, этот слой называется Buffy coat или лейкоцитарно-тромбоцитарный слой.  Наконец, плазма составляет чуть менее 55% от общего объема и представляет собой бледно-желтую жидкость. Лейкоцитарно-тромбоцитарный слой содержит лимфоциты, моноциты и тромбоциты. Этот слой аккуратно собирается центрифугируется дважды в буферном солевом растворе, чтобы промыть PBMCs от градиента плотности и удалить тромбоциты. Полученные PBMCs могут быть использованы для дальнейшего выделения клеточных субпопуляций или других экспериментов.

Скачать PDF: Isolation of mononuclear cells from human peripheral blood by density gradient centrifugation (special protocol)

snc1571571 18.07.2020 Комментариев нет Категории: Справочник по технологиям Поделиться